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从房间出去之后遇到Mario，按住E键使用鹰眼可以看到从墙上爬到上层的路线，按右键小跑，右键加空格冲刺，爬上去之后和Mario会合，然后跟着他离开这里。路上遇到人群的时候按shift可以把人推开，遇到敌人后按左键攻击，右键防御，敌人攻击瞬间按右键加左键防守反击。
跟着Mario一路飞檐走壁，爬上一栋塔楼之后把苹果交给Mario，然后两人一起跳了下去。
一段载入之后来到了自己的城外，骑着马跟着Mario，进城之后遇到妹妹，三言两语之后去地图上的三个任务点，分别是帮一个女人搬东西。
帮Mario的手下抓马。跑到马的侧面，按shift可以骑上马，然后骑到目标点把马交给Mario的手下。
三个任务都完成后去Mario的房子，和几个人交代下之后去二楼自己的房间，入浴之后和女女睡了一夜，早上起来之后听到了炮声，然后一颗炮弹飞进房间。
来到室外之后发现城市遭到了攻击，炮弹四处乱飞，跳到楼下后骑马到城墙下，然后从梯子上爬上城墙。
尽可能快的跑到加农炮那里，在城市被破坏之前轰掉下面敌人的大炮，左边的加农炮被毁后去用右边的。过一会敌人登上了城墙，过去支援友军。
普通步兵之前已经遇到过了，解决掉之后出现拿斧子的重型兵，普通攻击能被防住，先按空格踢他一脚后再用武器攻击才可以干掉。
杀光敌人之后城市的大门被炸开，进来的是Mario和游戏一开始遇到的那个男的，他拿到了苹果，而且准备杀掉Mario。Ezio匆忙冲过去，不过没能够阻止他。
Mario被杀，Ezio也中弹从房顶落下。
被几个手下救起来之后和他们一起杀到Mario的房子那里，房前Ezio的妹妹正在被袭击，过去救出妹妹，然后跟着她进入家里的暗门，从地下通道跟着平民一起逃走。
逃出来之后Ezio和家人分别，独自一人前往罗马，路上由于伤势过重，从马上摔了下来。
时间回到现代，Desmond在机器上醒来，一行人已经来到了Mario的家，比起古代版的就是多了些照明灯。
来到后院可以看到Ezio的幻影，跟着幻影走可以看到栅栏有个破口，从破口跳下去有个山洞，和女女一起进去。
在山洞里也可以看到很多幻影，到门边使用开关让女女从门下钻过去，然后从左边的墙上爬上去，走另一条路。
这里的开关要按住任意键不放，等女女通过后才能松开，然后等她按下那边的开关放下梯子，游泳过去爬上岸。
到了断桥后把女女扔到对岸，然后等她放下来个落脚点再跳过去。
等把地下室布置好后跟着男的上楼，对话之后使用鹰眼模式看到旁边的电路盒，按任意键搞定，剩下还有三个，在下面的城市里，使用鹰眼模式都找到之后回到地下室再次躺到机器上。
这里讲了下训练课程，在规定时间内杀掉一定数量的敌人，这里打个什么成绩无所谓，完成之后就可以继续了。
Ezio醒来之后已经身处罗马，被一个不认识的妇女救了，穿好衣服后出门找医生。
从医生那里买了药之后上目标出的高塔，按E环视城市后跳下去。
落到草堆后外面有几个敌人，等他们谈完话后跟踪他们，不要离得太近，多找掩护或者混在人群里跟踪。
跟踪一段时间后等他们攻击平民后过去都杀光，然后和那个平民对话。
对话之后去高处的目标点找要刺杀的人，周围几个守卫，轻易可以干掉，干掉目标人物后完成任务。
接下来去见Machiavelli，一路跟着他走，到铁匠铺前他会给Ezio买东西的钱，买了新的护甲和武器后继续跟着他走。
到敌人区域附近后让Machiavelli在马厩旁边等着，然后进入敌人的区域，干掉头上有红十字盾牌符号的敌人，然后回到Machiavelli身边。
交谈之后爬到敌区内的塔楼顶部，按shift点燃塔楼之后跳下来再次和Machiavelli交谈，然后跟着他去马厩。
到马厩前按E升级，然后骑上一匹马跟着Machiavelli走，路上会被一个小偷把钱偷走，下马后追上去，右键加shift可以把他推倒，之后要杀要剐的自己看着办吧。
搞定小偷之后再去找Machiavelli，继续骑马跟着他，遇到自己人被敌兵包围时过去把敌人杀光，杂兵杀光之后还有个逃走的，像抓小偷时一样抓住他就可以完成任务。
接着来到一片遗迹中的目标点，这里中了埋伏，一群披着狼皮的敌人出现，数量多但是很弱，杀光之后从右边的暗门进入地下。
怕上面的柱子后跳到两边的平台，使用两个操作杆把房间中央的池子注满水，水满了后一根柱子会倒塌，把中间的水池砸开，从砸开的大洞跳下去。
到下层之后可以看到目标的门前不能直接过去，要从旁边可以进入的房间绕道，利用墙上凸起的砖块爬过去，然后打开这扇大门。
接下来这个房间很多地方着火了，利用地上的雕像跳到左边的墙上爬到对面，再到对面一个只有下边的雕像上跳到左边墙上，爬到隔壁房间。
这个房间也是利用墙上的凸起跳到中间的柱子上，然后利用单杠跳到目标房间里。
来到一个四处都是柱子的大厅，房间中央有个火堆，看房间两边的墙上，找找哪里有像图中这样的木头，找最低点然后跳上去，接下来的路就很明显了。
绕大厅一周后再利用这些分散的柱子跳到目标房间。
最后的房间里有很多宝箱，搜刮一空之后在目标箱子里拿出钥匙，得到全部钥匙后可以解锁游戏里最强的一身护甲，就像二代的阿泰尔护套装一样。
从地下出来之后遇到Machiavelli，跟着他来到地下通道，这里连接着城市里的很多点，像车站一样的作用，不过这些点都需要到实地升级才行，就像马厩一样。
地图上有三个任务，先去最近的妓院，到达之后得知一个妓女被抓了，要拿钱赎人，去目标点的船上把钱给敌人后他们反而干掉了妓女，不过接下来的他们的命运也只能是去陪她。
回到妓院后发现Ezio的老妈和妹妹在那，交谈之后决定由妹妹来管这家妓院，到楼下找建筑师改装下这栋建筑后完成任务。
接着去找Bartolomeo，出他家出来之后同伴正在和敌人交战，不用管敌人杂兵，去追头上有十字盾牌标记的敌人，干掉他之后去敌区的高塔上，把塔点燃后再回到Bartolomeo的家，找建筑师把房子改装之后完成任务。
接下来去找Volpe，交谈之后去目标点和他会和，可以看到Machiavelli从一个敌人卫兵那里拿到了什么，之后同伴出现，和敌人交战，下去帮忙干掉所有杂兵。
杂兵死光后带着一个受伤的同伴去目标点，不能被发现，多利用人群掩护自己。
把同伴平安送到目标点之后发现自己通缉度是满的，找到头上有红色眼睛的标记的人干掉，这样可以减掉百分之七十五的通缉度，然后再撕一张通缉令通缉度就清零了。
再去目标点找Volpe，谈话之后去找建筑师改装建筑，然后去找Machiavelli，到Machiavelli的房子之后和几个同伴交谈，然后再去找建筑师改造房子，Sequence 3完成。
去地图上的任务点，可以看到和Ezio睡了一晚上的女的被带到了敌人城堡，潜入敌人的城堡，被发现也无所谓。
爬到城墙上进入敌区内部，先干掉周围房顶上的弓箭手，然后从城堡的墙上爬到楼顶，干掉楼顶的卫兵后进入城堡内部。
下楼之后来到关押女女的牢房，干掉两个卫兵后河女女对话，要去找敌人的女女要钥匙。
上楼梯到天台的花园，从旁边的墙上爬进去后找敌人要钥匙，干掉从过来的几个卫兵后按shift抓住女的，带着她下楼去牢房。
路上遇到卫兵的时候按shift放开她，干掉卫兵后再抓住，也要小心不要被她挣脱开，在楼梯上被她推倒的话半天爬不起来，她又会跑回天台上。
把她带到牢房后救出女女，由于女女受伤了，要抱着她走，路上遇到敌人的话就放下女女再打。
来到室外后要打开城堡的大门，有两个操作杆，在左右两边，抱着女女过去都使用之后大门会打开，从大门出去后两个人一起骑马离开。
过桥之后Ezio从马上下来，要为女女争取逃跑事件，一个人在桥头上挡住敌人的卫兵，一分半钟的时间不断有敌人过来送死，过了时间后逃离敌区完成任务。
接着去找Machiavelli，交谈之后去图中地图上的这个点，兄弟会需要人手，帮着被士兵围殴的人解围，杀光之后交谈，对方会加入兄弟会。然后看下地图去第二个点，再救一个之后完成任务。
再到任务点，发现一个妓女被杀了，要去追犯人，一路上有其他妓女指路，找到犯人后直接追上去干掉。
来到码头看到一个小孩正在哭，过去询问情况得知他妈被抓了，去目标点使用鹰眼看到敌人，然后跟踪。
等看到那孩子的妈妈后过去把所有人都杀光，然后去找达芬奇，对话之后坐到椅子上，达芬奇可以制作双袖刀，高级攀爬的手套等等，选一样想用的之后他回去制作，等他回来后装备上，然后去任务地点。
这里要在不被发现的情况下潜入敌区内部，爬到房顶后跳到敌人城墙内，小心塔楼上的敌人和巡逻的。
暗杀掉几个比较碍事的敌人后到目标点把武器设计图纸烧掉，然后从这里的墙上爬到房顶，到另一边。
把这里的炸药桶点燃后逃走，在指定时间内逃到目标区域后敌人武器会被炸毁。
不过有敌人驾驶马车带着武器跑了，骑马追上去，路上敌人会不断地向Ezio射击，不过肯定打不中，追一会之后会把敌人马车抢过来。
驾马车逃走，路上有骑马的敌人在两边夹击，控制方向把他们挤下马。
接着到马车后面使用武器干掉后面不断追上来的敌人，路上经过的房子上的敌人可以通过打爆旁边的炸药桶干掉。不再有敌人追上来的时候上马，破花掉了武器，然后回到罗马。
回到兄弟会和同伴交谈之后从房间里查看下桌子上的图，然后离开房间。
去见妹妹，谈话之后去目标点，目标人物正在被敌人围殴，把他救出来之后带他离开，一路上要保护他不被敌人干掉。
带她到目标点后和他交谈，然后他先走一步去交易地点，Ezio跟上去，到目标点后跟踪他和几个卫兵。
到达目的地的教堂，绕道建筑后面爬到教堂顶部，可以看到卫兵正在一个人检查箱子，从房顶的缺口按shift，然后慢慢爬下去。
到了能落脚的地方后走到卫兵的正上方，直接袖刀干掉他，然后换上他的衣服，搬着箱子走人。
抱着箱子在前面走，后面两个卫兵跟着，走错落的话会被怀疑，立刻改道就可以了，过桥之后把箱子交给其他的卫兵，然后离开。
在交代几个妓女把箱子偷回来之后继续跟踪卫兵，等他们到了banker那之后妓女偷回了箱子。
到妓女堆里带她们前进，路上的卫兵会被妓女带走，继续跟踪banker。
到了目的地后在人堆里躲过卫兵，然后到建筑的楼梯那里，用枪射杀banker。
回去找妹妹，到地方后妓女告诉Ezio她们把箱子偷回来后被跟踪了，Ezio匆忙进屋查看情况，结果敌人全被妹妹一人收拾了。
去找Bartolomeo，在他那里遭到了袭击，大量的敌人从三个城门里涌进来，迅速解决掉之后去关城门，不要只顾着杀人，Bartolomeo很弱的，不一会就会被杀。
三个门都关上后敌人的头头出现，他拐走了Bartolomeo的老婆。
等他走了之后和Bartolomeo骑马去他城前，但是不进不去，要想别的办法了。
到地图上的几个点，杀掉20个敌人，那他们的衣服来乔装，选三个比较近的点，把敌人都杀光就够了，不要放走那些临阵脱逃的。
杀掉20个敌人后回到Bartolomeo那里，换装完毕后跟着大部队走，路上会遇到几个真货，暗杀掉他们，然后到敌人的城前。
Bartolomeo伪装成被抓的样子，一群人带着他进入城里，来到头头面前，杀掉这里的几个卫兵后头头带着Bartolomeo的老婆跑了。
追上去，城里一片乱战，不是敌人主动找过来的打架不要管了，到另一个城门前，干掉几个卫兵后打开城门出去。
头头带着Bartolomeo的老婆躲到了建筑后，这对Ezio来说也是很好的掩护，不要从正面过去，从右边的房顶上爬过去，背后干掉他。解放了Bartolomeo老婆后完成任务。
去酒吧找Volpe，交谈之后从酒吧出来，和同伴一起抵御不断杀过来的敌兵。
把所有杀过来的敌人都干掉后骑马跟着Volpe走，一路上会几次遇到同伴倒在路上，每次都要干掉杀过来的敌人，然后继续上马跟着Volpe。
谈完之后去目标点的城门口，跟踪一个骑马的敌人Micheletto，骑上身旁的马慢速跟着他，离太近的话他会转身，马不好控制，暴露的几率很大。
倒了一片遗迹后他会下马进去，Ezio也跟着下马，从旁边翻墙进去，也可以等Micheletto走远点后杀进去。
到遗迹后面的时候Micheletto会给一个卫兵什么东西，等他走了后过去干掉卫兵，然后继续跟踪。
接下来他还会去两个点见几个卫兵，把他见过的所有卫兵都杀掉，最后跟踪他来到竞技场。
竞技场入口有卫兵进不去，从墙上爬进去，不能被发现，到目标点之后镜头会扫过接下来要走的路，好好看清楚了，一会就按照这路线走。
按照刚刚镜头指示的路线来到竞技场下层，干掉这里四个卫兵，然后跳到最底层的目标点，换上敌人的衣服。
从左边没敌人站岗的入口进入竞技场内部，使用鹰眼看下自己该站到哪，一共要换三次位置，最后一次可以来到目标的Micheletto面前，干掉他。
接下来把钉在十字架上的人放下来，然后把他报道竞技场外的医生那里，给他疗伤后Ezio看到了之前在Mario那里的一个手下，他看到Ezio拔腿就跑，追上去。
路上还会被敌人追，也会被堵截，尽量绕开，这家伙跑得很快，被拦到的话就很难追上了，抓住他之后发现他是个叛徒。
Volpe以为Machiavelli是叛徒，要去刺杀他，Ezio必须去阻止，时间有限，快马加鞭的过去吧。
成功阻止Volpe之后回到兄弟会，让妹妹加入了兄弟会，并且Ezio成为了兄弟会的首领。
进入敌人城堡的大门，爬上城墙后进入城堡内，干掉里边的卫兵后到门边点的门进去。
利用墙上的凸起点爬到高层，到楼上的书房后利用书架跳到二层，干掉敌人后从窗户出去。
爬到楼顶，从另一边爬下去，到窗口处进入，女女告诉Ezio了Cesare的位置，下楼去追他，遇到他的时候不慎被他逃走，门被锁住了。
利用楼梯上的垫脚物跳到木杠上，爬到上层。
到上层后向下看，Cesare从下边的城墙上跑过，立刻跳下去追他，时间紧迫，路上的敌人不要管，快到城墙尽头时跳到下边的河里。
从河里爬上来之后向着目标点狂奔，路上的敌人不要管，一边跑一边按E把马叫来，然后骑上马去目标点。
来到目标位置后使用鹰眼，然后到房间中央的莲花这里按shift拿到苹果。
紧接着几十个敌人从两边杀了过来，等她们都围上来之后按住左键使用苹果，苹果的光有两种，黄色的和白色了，外围一圈是黄光，能让敌人自相残杀。
里面一层是白光，直接能让敌人挂掉，不过使用苹果会消耗自己的生命值，不要一次把血用光了，以防万一，虽然会自动回血，但不会立刻回满。
回到兄弟会和同伴交谈之后去目标点找Cesare，又被他跑了，干掉这里所有敌人然后去找妹妹。
和妹妹谈完之后去遗迹，找到目标任务后跟踪他去竞技场，这里再次让Cesare跑了。干掉竞技场里所有的敌人。
再回到兄弟会和同伴交谈后又去找Cesare，这次他可跑不了了。
把他的手下都干掉后他就被教皇的人逮捕了。
这里回到了游戏开始时的场景，连按左键用袖刀攻击，然后Cesare逃走，一群杂兵围了上来，全干掉之后Ezio被炮弹炸昏。
醒来之后骑上身边的马去目标地点，快到地方的时候马会被炮弹炸死，步行去目标点。
目标在敌区，周围都是敌兵，暗杀进去或者大摇大摆的杀进去都无所谓。
杀过一个村子后又看到一个攻城塔，爬上去之后干掉上边的敌人，见到Cesare。
要在这里解决他，打发像打长矛兵，重型兵一样，先踢一下在攻击，他攻击的时候不能防守反击，躲开再反击。
期间还会不断的有杂兵过来碍事，先解决杂兵再打Cesare，打掉他一部分血之后连按左键用袖刀攻击，然后继续回到普通模式打。
最后Cesare没血了，直接扑到飞刺，不过Cesare似乎认为没人能杀自己，所以Ezio把他从楼上扔了下去。
这段记忆的最后看到Ezio把苹果放倒了罗马竞技场，然后离开。
从机器上醒来后上楼梯，使用鹰眼查看墙上的密码，然后一行人驱车来到罗马竞技场。
进入暗门后头上的地面会打开，爬上去后来到一个教堂，给同伴打开门，到教堂前面的十字架上，然后跳到机关处，开启机关后教堂的天花板上降下来一个平台。
利用天花板上的吊灯之类的东西爬到降下来的平台是触发开关，刚刚的十字架前会出现一个石柱。
回到地面后触发石柱，地面向电梯一样的降到了地下。
来到这个房间后进入正前方楼梯上的门，到达放苹果的房间。
到一个像是控制台的地方激活石柱后右边地上会升起来像图中一样的石墙，爬上去，遇到有两个操作杆的地方用鹰眼观察，看闪白光的是哪个，然后跳上去，错了的话地上的石墙会全都降下去，不得不重来。
绕房间一周后回到一开始的平台上，房间里的石墙都升了起来，这时候连接到房间中央放苹果的平台的楼梯也升了起来。
上楼梯之后拿到了苹果，不过之后Desmond的身体失去控制，按方向键后一步步的逼近Lucy，最后一刀刺中了她，然后两人一起倒地，游戏结束。